建议血清*好保存在-15℃以下。若一次使用不完一瓶,建议无菌分装于适当的**容器内冷冻备用。
我们建议将血清从冷冻箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解冻,然后在室温下全融,解冻过程中必须规则地摇晃均匀。
血清中絮状沉淀产生的原因有很多,其中*普遍的还是由于血清中脂蛋白的变性所致,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,这也是造成沉淀的主要原因,但这些絮状沉淀并不影响血清本身的质量。欲去除沉淀,可采取自然沉降法或者将血清分装于无菌离心管中,2000~3000rpm离心5min。一般不建议用过滤的方法去除絮状沉淀,因为沉淀会阻塞滤膜,造成过滤困难或无法过滤。
诸多研究表明大多数细胞的培养无须进行血清的热灭活;而在**学研究和ES细胞、昆虫细胞、平滑肌细胞的培养过程中,推荐使用热灭**清。实验显示,经正确热灭活处理的血清,对细胞的生长只有微小的促进或完全没有促进作用,而通常因为高温处理影响了血清的质量,造成细胞生长速率降低。并且热处理过的血清,沉淀物明显增多,倒置显微镜下观察呈“小黑点”,往往会使研究者误以为是血清受到了污染,而把血清放于37℃中,沉淀物又会更增多,有会使研究者误认为是微生物的分裂增殖。因此我们建议若非必须,可以不进行热处理,既节省时间又确保质量。
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