李斯特氏菌显色培养基

用途：用于李斯特氏菌的显色培养，单增李斯特氏菌显蓝色，外围有一不透明环

李斯特氏菌显色培养基可快速检测食品和药品中单增李斯特氏菌。阴性结果可在 3 天内检测完成。单增李斯特氏菌显蓝色，菌落周围有一不透明环。蛋白胨提供氮源和氨基酸，氯化钠维持渗透压，琼脂是凝固剂，氯化锂抑制革兰氏阴性菌生长，抑菌剂抑制除李氏菌外的革兰氏阳性菌生长。

成份 (g/L)

基础培养基：

李斯特氏菌添加剂 6.0g

李斯特氏菌抑菌剂 1 1ml*5 支

李斯特氏菌抑菌剂 2 1ml*5 支

此配方可以进行改良或增加营养成份以获得*佳的结果。

注意

此培养基仅供实验室使用。

用法

称取基础培养基 14.2g 加入 180ml 蒸馏水，加热溶解并不停搅拌；另取 1.2g 李斯特氏菌添加剂，加入 20ml 无菌水，并加入一些玻璃球，不停振动，使其乳化均匀，将二者分别于 121 ℃高压** 15 min 。冷至 50 ℃左右时，把李斯特氏菌添加剂加入基础培养基中，并加入李斯特氏菌抑菌剂 1 和 2 各 1 支，混匀，倾入无菌平皿。使培养基的厚度约为 5mm ，这样有利观察不透明环。

贮存

制备好的固体平板保存于 2-8 ℃，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处， 保存温度 2-8 ℃

失效

干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。

操作步骤

使用前，把制备好的培养基放置室温 10-20 分钟。

1 、按 SN 标准、 GB 标准、 FDA 标准、 ISO 标准或其它标准制备样品液；
2 、把 25g 样品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培养 48 小时；或把样品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 ： 10 的比例混匀， 30 ℃培养 24 小时。
3 、取一环增菌液划线接种到李斯特氏菌显色培养基上， 37 ℃培养 24-48 小时。

质量控制

1 、外观

此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈淡黄色。制备好的平板呈不透明乳白色培养基。

2 、微生物试验

在 37 ℃培养 24-48 小时：

典型特征

单增李斯特氏菌 37 ℃培养 24-28 小时， 平板上出现蓝色菌落，菌落周围有一不透明环。绵羊李斯特氏菌 37 ℃培养 48 小时 ，平板上出现蓝色菌落，菌落周围有一不透明环。西尔李斯特氏菌 37 ℃培养 24-48 小时， 平板上出现蓝色菌落，菌落周围没有不透明环。在食品检测中绵羊李斯特氏菌非常少见。

参考文献
1、VAN NETTEN, P., PERALES, J., VAN DE MOOSDIJK, A., CURTIS, G.D.W., a. MOSSEL, D.A.A.: Liquid and solid selective differential media for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes. – Int. Food Microbiol., 8; 299-316 (1989).
2、HAMMER, G., HAHN, G., KIRCHHOFF, H., a. HEESCHEN, W.: Vergleich der Eignung von Oxford - und PALCAM-Medium zur Isolierung von Listeria monocytogenes aus Weichk?se. – Dtsch. Milchwirtschaft, 41; 334-336 (1990).