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细胞培养中微生物污染的排除

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系列 目录号 规格
一次性移液管 GSP010001 1ML,**,黄色环,1/包,500/
巴斯德吸管 PP101002 0.2ML,**,1/,5000/
一次性离心管 CFT000150 15ML,圆锥底,不**,500/ 包,500/
一次性微量离心管 CFT000005 0.5ML,不**,1000/包,8000/
一次性细胞培养板 TCP001006 6WELL,**,普通型,100/
一次性细胞培养瓶 TCF001025 25ML,**,普通型,密封盖,10/包,200/
一次性细胞培养皿 TCD000035 3.5CM,**,普通型,10/包,960/
细胞培养转瓶 TCB001002 2000ML,**,悬浮细胞,密封盖,1/包,12/
培养液瓶 CTF010150 150ML,**,1/包,24/
针头式过滤器 FMC201013 MCE膜,黄色,0.22UM,13MM100/盒,800/
真空式过滤器 FMC201150 MCE膜,150ML0.22UL1/包,12/
接收瓶 FRB000150 150ML,**,1个/包,24个/箱
酶标板 FEP100096 96孔,不可拆,高结合力,10/包,200/
一次性接种环/接种针 DIL011001 1.0ul,白色,**,20/包,2000/
一次性血清板 SLP000096 96WELL,不可拆,10/包,200/
一次性血清管/样品管 SST001015 1.5ML,可立裙边,**,20 /包,5000/
深孔板 DMP160096 1.6ML96孔,U型底,不**,1/包,50/
一次性细胞冻存管 FCT001005 0.5ML50/包,5000/
比色皿 CUV010045 4.5ML10*10*452*光窗,100/盒,1000/
一次性PCR管 PCR100200 0.2ML,鼓盖,8连管,125/包,1250/
一次性**培养皿 MCD000035 3.5CM,**,10/包,960/

      细胞受各种霉菌、**和支原体污染后,一般都较难排除或杀灭,其中以支原体更难排除,因此从预防着眼为上。
      1、*****法:
      用BM-1(截耳素衍生物)和BM-2(四环素衍生物)抑制支原体
(1)***制备:均可用PBS配成250×浓缩液-20℃备用,使用浓度参考《组织培养和分子细胞学技术》117页表6-2。
(2)处理:取受支原体污染的细胞,吸除培养液,加入含BM-1的1640培养液培养3天后,吸除培养液,再加入含BM-2的1640培养液培养4 天,如此连续三个轮回。
(3)检测:用33258荧光染色镜检(每个轮回末应检测一次)。
(4)培养:**支原体后的细胞,在不加上述***的培养液中,再传代培养3~4次。
(5)镜检:如**不彻底可再进行处理至纯净为止(一般3个轮回即能被完全消除)。BM-1和BM-2与CIP(4-氟,2-羟基喹啉)联合应用亦可,即先用含BIP培养液培养12天后,再按上述方法处理。
      2、加温**法
      把受污染的细胞置41℃中作用5~10小时。
      3、动物体内接种**法
      把受支原体污染的肿瘤细胞接种在同种动物皮下或腹腔中,借动物**系统消灭支原体,而肿瘤细胞却能在体内继续生长,待一定时间后,从体内取出细胞再进行培养繁殖。
      4、巨噬细胞吞噬法
      从动物腹腔采取巨噬细胞,为排除其它细胞成分,可先进行纯化,然后再加入被支原体污染的细胞培养液中混合培养。在培养过程中,为检查支原体是否已被消除干净,可利用支持物培养法验证,取出支持物逐日染色、镜检观察,至支原体已被消除干净为止。

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