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细胞培养常见问题

细胞培养常见问题

1.如何选用培养基？
培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，优选MEM做粘附细胞培养、RPMI- 1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的优选是AIM V培养基（SFM）
2.为什么要热灭**清？ 
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活**细胞和巨噬细胞。在进行**学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭**清。
3.L－谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？ 

L－谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后，L－谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L－谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，但是确切的降解率一直没有*终确定。L－谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。

创赛科技旗下的品牌博飞美科Perfemiker为您提供上等L－谷氨酰胺，产品名称: L-谷氨酰胺，L-Glutamine ，99%|56-85-9
CAS号: 56-85-9
分子式: C5H10N2O3
分子量: 146.15

品名含量	货号	品牌	市场价	折后价
L-谷氨酰胺   99%	C16-G105425-25g	Perfemiker	48.00	43.20
L-谷氨酰胺   99%	C16-G105425-100g	Perfemiker	76.00	68.40
L-谷氨酰胺   99%	C16-G105425-500g	Perfemiker	256.00	230.40

4.GlutaMAX-I是什么？培养细胞如何利用GlutaMAX-I？这个二肽有多稳定？ 
GlutaMAX-I二肽是L－谷氨酰胺的衍生物，将其不稳定的α－氨基用L－丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽，释放L－谷氨酰胺供利用。
GlutaMAX-I二肽非常稳定，即使在121磅**20分钟，GlutaMAX-I二肽溶液有*小的降解，如果在相同条件下，L－谷氨酰胺几乎完全降解。
5.为什么培养基中可以省去加酚红？ 
酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类**的作用（特别是雌**）。为避免固醇类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加有酚红的培养基。
6.如何用台盼兰计数活细胞？ 
用无血清培养基把细胞悬液稀释到200－2000个/毫升，在0.1毫升的细胞中加入0.1毫升的0.4％的台盼兰溶液。轻轻混匀，数分钟后，用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰，因而染成蓝色的细胞是死细胞。
7.如何消除组织培养的污染？
重要的培养污染时，研究者可能试图消除或控制污染。首先，确定污染物是**、**、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室**剂**培养器皿和超净台，检查HEPA过滤器。

高浓度的***和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性，因而，做剂量反应实验确定***和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用***如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。

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