让儿童痛不欲生的神经母细胞瘤 谁之过？

       神经母细胞瘤是婴幼儿*常见的肿瘤，晚期致命，即使有幸存活下来的儿童也是痛不欲生，一生遭受体能和智力的双重考验。*近波士顿儿童医院儿童肿瘤科John T. Powers博士研究发现let-7缺失是神经母细胞瘤产生的关键，使得神经母细胞瘤的**取得突破性进展，成果发表在Nature上。

      let-7 family是一类microRNAs，参与胚胎发育的调控和组织分化的维持等；能够对多种致癌基因的mRNA 进行转录后抑制（如RAS、MYC和HMGA2）来有效抑制肿瘤，let-7功能失调常见于多种肿瘤**包括神经母细胞瘤、肝癌、结肠癌、霍奇金病。而机体内有多种破坏let-7的方式：1）LIN28B是 RNA结合蛋白能够抑制let-7的产生；2）内源竞争性RNAs(ceRNA)和let-7结合进行miRNA sponge从而长效抑制； 3)染色体缺失，let-7基因缺失与多种实体瘤相关。
      MYCN是神经母细胞瘤的主要癌基因，25%的神经母细胞瘤儿童发生MYCN癌基因增殖（mRNA和protein均增多），预后非常差。那在神经母细胞瘤中，MYCN增殖与let-7失调之间有什么联系吗？作者发现：MYCN的mRNA 3’UTR上有两个let-7结合位点而且非常保守，表明两者功能密切相关，那两者到底是怎样相互作用的呢？JohnT. Powers等人通过加合**法将关于神经母细胞瘤的理论统一起来。他们发现，LIN28B对let-7的抑制只是几种参与let-7抑制的癌症机制中的一种。
      通过在非MYCN增殖神经母细胞瘤细胞系（SH-SY5Y ，SK-N-AS）**转LIN28B和MYCN（含或不含3’UTR及其突变体等）发现LIN28B确实能够抑制let-7从而促进MYCN的增殖，LIN28B/ let-7/MYCN符合前期结果。但关键的是他们在MYCN增殖神经母细胞瘤细胞系（BE(2)C 、Kelly）中利用Cas9敲除LIN28B时，MYCN的蛋白水平和细胞生长都没有明显变化（预期会减少！），let-7确实出现明显的去抑制现象，说明在MYCN增殖神经母细胞瘤细胞系中敲除LIN28B并没有影响。不禁追问，在MYCN增殖神经母细胞瘤细胞系中let-7和MYCN之间是怎样的相恨相杀呢？
      结合机体消除let-7的三种方式，排除LIN28B的抑制。那MYCN的mRNA可能是以miRNAsponge法将let-7**，即以竞争性内源 RNA（ceRNA）机制。作者先利用判定是否为ceRNA的标准：the miRNA : miRNA-target site 比率作为参考（原文：Evenupon LIN28B knockout, the MYCN-let-7-site:let-7 ratiois 1.35 in BE(2)C and 1.78 in Kelly）发现是符合的，在利用荧光素酶活性检测内源性的MYCN-3’UTR能够海绵式吸附let-7。
      let-7基因缺失引起染色体畸变致癌如神经母细胞瘤，且预后也非常差。let-7family中let-7a2和let-7g（分别位于Chr3p 和11q)基因缺失频率较高，但是作者临床数据统计发现let-7基因缺失与MYCN增殖现象这两种事件鲜少会同时发生。